Sau khi vượt qua nhiều thử thách, Oda Nobunaga lại phải đối mặt với khó khăn mới.
Imagawa Yoshimoto của xứ Suruga, nay thuộc tỉnh Shizuoka, đem quân tấn công Owari.
Quân Imagawa Yoshimoto có 25.000 người, trong khi quân Oda chỉ có khoảng 4.000 người.
Trước sự chênh lệch quân lực quá lớn, một số thuộc hạ đã quay sang theo Imagawa Yoshimoto.
Để khích lệ quân mình, đích thân Oda Nobunaga đã múa Atsumori.
Atsumori là một vở kịch Noh dựa trên truyện Heike, nổi tiếng với câu:
“Năm mươi năm của đời người, so với cõi trời, chỉ tựa giấc mộng hư ảo. Đã sinh ra trên đời, há có ai không diệt vong?”
Câu này có nghĩa là “50 năm nơi trần thế chỉ mong manh như một giấc mộng nếu so với thời gian trên cõi trời”. Người ta cho rằng Nobunaga múa để truyền đi thông điệp: “Đời người vốn ngắn ngủi, vì vậy đừng sợ chết mà hãy chiến đấu”.
Được khích lệ tinh thần qua điệu múa Atsumori, quân Oda áp dụng chiến thuật chỉ nhắm vào thủ cấp của Imagawa Yoshimoto. Nhờ cả thời tiết thuận lợi, họ đã tiêu diệt được ông.
Trận Okehazama kết thúc với chiến thắng thuộc về Oda Nobunaga.
Tiếp nối khí thế sau chiến thắng trước Imagawa Yoshimoto, ông còn bình định xứ Mino.
Ông gặp Ashikaga Yoshiaki, shogun thứ 15 của Mạc phủ Muromachi đang tìm kiếm một daimyo giúp khôi phục chính quyền. Hai người cùng tiến vào Kyoto và tuyên bố thống nhất thiên hạ.
Để thực hiện mục tiêu này, Nobunaga bắt đầu chinh phạt gia tộc Asakura tại Echizen, nay thuộc tỉnh Fukui.
Tuy nhiên, Azai Nagamasa, người kết hôn với em gái ông là Oichi, lại quay sang theo gia tộc Asakura.
Sau một số trận chiến, gia tộc Asakura cầu xin Ashikaga Yoshiaki đứng ra hòa giải, dẫn đến một thỏa thuận đình chiến tạm thời.
Thế nhưng Oda Nobunaga không tha thứ cho gia tộc Asakura và Azai Nagamasa nên đã tấn công chùa Enryakuji, nơi che chở cả hai.
Ashikaga Yoshiaki, người chấp nhận hòa nghị, cũng bị trục xuất khỏi Kyoto do bất đồng đường lối với Nobunaga, khiến Mạc phủ Muromachi sụp đổ.
Sau đó, Oda Nobunaga tiêu diệt gia tộc Asakura và Azai Nagamasa.
Trong lúc Nobunaga thúc đẩy công cuộc thống nhất thiên hạ, chùa Osaka Honganji bất ngờ khởi binh, kéo theo các cuộc nổi dậy Ikko-ikki trên khắp nơi.
Năm 1574, cuộc khởi nghĩa Ikko-ikki tại Nagashima ở Ise, nay thuộc thành phố Kuwana, tỉnh Mie, nổ ra nhưng bị ông đàn áp.
Dù lực lượng nổi dậy cầu xin tha mạng, Nobunaga vẫn bắt và chém giết 1.000 người cả nam lẫn nữ, đồng thời buộc Osaka Honganji đầu hàng.